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MBVS

Service de Biologie Moléculaire et Virus ou Plateforme de Vectorologie et Biologie Moléculaire

Biologie cellulaire | Imagerie | Biologie moléculaire | Biochimie | Génomique | Biologie systémique | Développement | Biologie structurale

La plateforme

Biologie cellulaire, Imagerie, Biologie moléculaire, Biochimie, Génomique, Biologie systémique, Développement, Biologie structurale Service de Biologie Moléculaire et Virus ou Plateforme de Vectorologie et Biologie Moléculaire

  • Directeur-trice scientifique Nicolas CHARLET BERGUERAND
  • Directeur-trice technique Paola ROSSOLILLO
  • UMR 7104 / UMR_S 1258 - IGBMC / Institut de génétique et de biologie moléculaire et cellulaire
  • CNRS, INSERM, UNIVERSITE DE STRASBOURG
  • Ilkirch-Graffenstaden
  • Monosite
  • Prestations de services
    • à la communauté académique
  • Collaborations de recherche
    • avec la communauté académique
  • Tutelles de rattachement
    • CNRS
    • INSERM
    • UNIVERSITE DE STRASBOURG
MBVS

Le Service de Biologie Moléculaire et Virus réalise des clonages et construit des plasmides pour tous type de experimentations (expression en E.coli, baculovirus, vaccinia virus, cellules de mammifère, vecteurs viraux, RNA interference, CRISPR-Cas9). Le service conçois et réalise des outils (systèmes de plasmides ou vecteurs viraux) pour la réalisation de projets complexes.
Nous réalisons aussi la conception, construction, production et purification de vecteurs Adéno-associés (actuellement 15 sérotypes de rAAV différents; titres entre 10E12-10E13 GC/ml selon le sérotype) et de vecteurs Lentiviraux à haute concentration (titres entre 10E8-10E10 TU/ml selon la taille du génome; production de librairies de Lenti-gRNAs pour criblages CRISPR à haut débit).

Expertises

Expertise scientifique

  • Biologie moléculaire
  • Biochimie et génétique
  • Biologie moléculaire des bactéries
  • Biologie moléculaire des lentivirus, des vecteurs adéno-associés, des rétrovirus
  • Culture cellulaire
  • Systèmes d'expression de protéines: E.coli, Baculovirus, Vaccinia virus, cellules de mammifère
  • ARN intérference, système Cre-lox
  • Systèmes CRISPR-Cas9

Expertise technique

  • Clonage par restriction/ligation, Sequence and Ligation Independent Cloning, Gibson Assembly, Golden Gate
  • Isolement et amplification de gènes à partir de ARN et cellules
  • Construction de plasmides complexes
  • Construction, production et purification de vecteurs Adéno-associés (12 sérotypes différents)
  • Construction et production de vecteurs lentiviraux à haute concentration
  • Production de banques de lentivirus-CRISPR
  • Clonage de séquences riches en GC, toxiques, de grande taille

Ressources

Principaux équipements

  • 2 Incubateurs CO2 Panasonic Safe CellUV
  • 2 PSM Herasafe KS 12
  • Ultracentrifugeuse Optima XPN-90 Beckman Coulter + rotors SW32Ti, 50.2 Ti
  • Microscope à fluorescence EVOS-FL
  • Centrifugeuse Allegra X-15R Beckman Coulter
  • Incubateur/Agitateur INFORS HT Multitron
  • U Genius Syngene + imprimante
  • Centrifugeuse réfrigérée Eppendorf 5804 R
  • MasterCycler Nexus Gradient + Nexus x2e (appareil PCR à trois blocks)
  • Freezer -80°C U535 Innova
  • 2 centrifugeuses Eppendorf 5424

Locaux spécifiques

  • Laboratoire L2

Ressources logicielles / bases de données

  • Logiciel SnapGene

Autres types de ressources

  • Plasmides pour expression en E.coli, baculovirus, mammifère,construction de vecteurs lentiviraux, rAAV, CRISPR
  • Souches bactériennes

Exemples de prestations de service

  • Clonage: clonage de un ou plusieurs gènes dans un plasmide avec la technique plus adaptée à la séquence traitée. Plasmide fourni avec carte et séquence précise (logiciel SnapGene)
  • Production AAV LP: conception, production, purification, concentration, titration de vecteurs Adéno-associés recombinants. rAAV à 10E12-10E13 GC/ml.
  • Production Lenti haute concentration: conception, production, purification et titration de vecteurs lentiviraux. Concentrations 10E8-10E10 TU/ml
  • Production AAV test: production d'une quantité limitéé de rAAV pour valider le choix du sérotype.
  • Formation clonage: execution de la partie clonage des projets avec l'étudiant, conseils sur la startégie et l'exécution des différentes étapes du clonage.